鬼笔环肽

取自 食品百科全书

[编辑] 鬼笔环肽（phalloidin 鬼笔鹅膏素）是从一种毒性菇类中分离的剧毒生物碱

分子式C35H48N8O11S。无色，细针状结晶，系从毒蕈类鬼笔鹅膏（Amanita phalloides）中得到的有毒的环状七肽。与鹅膏蕈碱（amanitin）一起存在，毒性比鹅膏蕈碱弱，对小鼠的致死剂量是50微克，对人体也有很强的毒性，可引起流涎、呕吐、便血、发绀、痉挛、肌肉挛缩，以致死亡。它同细胞松弛素的作用相反, 只与聚合的微丝结合, 而不与肌动蛋白单体分子结合。它同聚合的微丝结合后, 抑制了微丝的解体, 因而破坏了微丝的聚合和解聚的动态平衡

鬼笔环肽（phalloidin）是从一种毒蘑菇Amanita phalloides中提取出来的毒素，FITC和Rhodamin等荧光物质标记的鬼笔环肽可特异的与真核细胞的F-acting结合，从而显示微丝骨架在细胞中的分布。

鬼笔环肽的配制：0.1mg鬼笔环肽溶于1ml无水甲醇（也可用DMSO或无水乙醇溶解）配成贮存液，可在-20度避光的条件下长期保存，工作液的浓度为5ug/ml，由贮存液加生理盐水PBS稀释20倍即可。

染色程序：

生理盐水PBS清洗细胞2次，每次10分钟；

3.7%-4%的甲醛或多聚甲醛固定20分钟，生理盐水PBS清洗细胞2次；

加入5ug/ml的FITC-鬼笔环肽室温染色30-60分钟，夏季时间可以短一些，生理盐水PBS清洗细胞2次；

DAPI或hoechst33258染细胞核10分钟，生理盐水PBS清洗细胞2次；

吸去多余水分，加荧光封片液（中性或偏碱性缓冲液加等量甘油），盖上盖玻片，荧光或共聚焦显微镜下观察。

注意事项：

鬼笔环肽的分子量小，很容易通过细胞，不需要对细胞进行冷丙酮和TRITON X-100处理。

药品价格昂贵，0.1mg的售价接近两千元，要节约使用。

毒性较大，戴上手套操作。